黄曲霉毒素B₁的现场快速检测

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有关中毒参考资料

方法编号：CDC-5512

1. 适用范围：本品适用于谷物、坚果及籽类等物质中黄曲霉毒素B₁（简写为AFB₁）的现场快速检测。

2. 检测意义：黄曲霉毒素B₁是已知的化学物质中致癌性最强的一种，致癌能力为二甲基亚硝胺的75倍，比二甲基偶氨苯高900倍。黄曲霉毒素B₁的极性毒性是氰化钾的10倍，砒霜的68倍，其毒性作用主要是对肝脏的损害。在天然食物中，以黄曲霉毒素B₁最为多见，危害性也最强。黄曲霉毒素对光、热、酸较稳定，只有加热到280～300℃才裂解，高压灭菌2小时，毒力降低25%～33%，4小时降低50%。

3. 测定原理：本品采用高度特异性抗体抗原反应及免疫层析分析技术，通过单克隆抗体竞争结合AFB₁-BSA偶联物和样品中可能含有的AFB₁的原理。试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的AFB₁-BSA偶联物和被胶体金标记的抗AFB₁单克隆抗体。检出限为5 ppb（ug/kg）。

4. 黄曲霉毒素B₁限量指标：玉米（面、渣、片）及制品为20ppb；花生及其制品为20ppb；稻谷、糙米、大米为10 ppb；小麦及粉、大麦、麦片其他谷物（含去壳谷物）、发酵豆制品为5 ppb；熟制坚果及籽类为5ppb。

6. 样品前处理：

6.1取有代表性样品充分粉碎，准确称取粉碎后的样品1.0g（如果是初筛，比如，可直接取1.0g大米进行检测，发现样品超标后，再将样品粉碎称量检测），于大离心管中，根据不同样品对黄曲霉毒素B1的限量标准要求不同，参考下表加入不同体积的提取液；

AFB1限量（ppb）	5	10	20
使用提取液体积（ml）	2.5	5	10

6.2将瓶塞盖紧密封，充分振荡3min，静置分层或4000rpm离心1分钟；

6.3取100ul上清液与700ul 稀释液或2滴上清液（吸管每滴=0.035ml）与10滴稀释液(滴瓶每滴=0.05ml)于小试管中，充分混匀后为待检液。

7 测定

7.1 将未开封的试纸卡和含有红色试剂的微孔杯恢复至室温；

7.2 取3滴无气泡的待检液到微孔杯中，缓慢抽吸使待检液变为粉红色；

7.3 将此待检液滴加到平放着的试纸卡加样孔中，开始计时；

7.4 在5min时读取结果，8min后的结果仅作参考。

8 结果判定

8.1阳性：C线显色，T线不显色，判为阳性（超标）。

8.2阴性：C线显色，T线肉眼可见，无论颜色深浅均判为阴性。

8.3无效：C线不显色，无论T线是否显色，该试纸均判为无效。

有问有答